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重组蛋白下游纯化工艺的开发
发布时间:2012年02月10日来源:字体:[大][中][小]

一、工程菌株的表达量:
    1、建立稳定的工程菌株种子库,提供摇瓶培养和发酵罐培养的表达结果。
    2、工程菌摇瓶培养条件和诱导条件。
    3、工程菌发酵罐培养的培养基配方、工艺、生长曲线、生物量数据。
二、小试工艺
    1、根据目的蛋白表达方案的设计,采用下游工艺的各种分离纯化方法的组合,包括菌体破碎、离心、超滤、透析、柱层析等方法,建立目的蛋白的纯化工艺路线,获得纯度符合客户要求的目的蛋白。
    2、如果客户需要Native序列的目的蛋白,还需要结合酶切工艺,选择合适的工具酶,如SUMO蛋白酶、EK酶、TEV蛋白酶、凝血酶去除标签蛋白,再纯化获得目的蛋白。
    3、如果目的蛋白以包含体形式表达,需要进行包含体的复性工艺研究,使变性蛋白折叠为具有生物活性的蛋白质,再进行分离纯化。
三、大规模制备:
    1、根据客户要求放大生产规模,制备客户需要的目的蛋白产品。
    2、提供批量生产的工艺记录及检测结果数据。